普氏菌(基因组DNA)-SHMCCD62200-极小海螺菌

使用前建议在65℃水浴中加热5分钟，然后在冰浴中冷却3分钟，以避免COS位点的片段结合。

T5核酸外切酶（T5 Exonuclease）是一种沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶，能够从DNA的5'末端或线性/环状双链DNA的缺口（gap）或切刻（nick）处起始消化。它对超螺旋双链DNA无作用，并且具有单链DNA核酸内切酶活性。 特性与应用 高效降解：T5核酸外切酶能够高效降解线性单链和双链DNA，以及切刻的质粒DNA。 无缝克隆：在无缝克隆技术中，T5核酸外切酶用于从DNA片段的5'端切割一条链，产生3'突出末端，促进互补片段的退火配对，进而通过DNA聚合酶填补缺口，最后由DNA连接酶修复缺刻，形成完整的环状质粒。 Gibson组装：T5核酸外切酶在Gibson组装中发挥关键作用，通过从DNA片段的5'末端开始消化，产生互补的单链3'末端，促进片段退火和连接。 去除污染：该酶可用于去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性DNA，提高DNA克隆效率。 使用方法 储存条件：T5核酸外切酶通常保存于-20℃，有效期可达3年。 反应条件：在37℃下反应30分钟，加入至少11 mM EDTA或含有SDS的DNA Loading Buffer终止反应。

dNTP/dUTP Mixture 与尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）联合使用可有效降解含dU的假阳性

在分子生物学实验中，6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂，广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中，帮助核酸样品沉入凝胶加样孔并提供电泳迁移的示踪功能。 组成成分及作用6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 的主要成分包括：二甲苯青（Xylene Cyanol FF） 和 溴酚蓝（Bromophenol Blue）：这两种染料在电泳过程中作为示踪剂，帮助观察电泳的进程。聚蔗糖（Ficoll）：增加样品密度，使样品能够沉入凝胶加样孔中。Tris-HCl 和 EDTA：Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境，而 EDTA 可以螯合二价金属离子，防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法混合比例：通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。电泳操作：混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中，通过观察染料的迁移情况来判断电泳是否完成。特点与优势双色示踪：二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同，分别对应不同大小的 DNA 片段，可提供更准确的电泳进程指示。

dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液

50×TAE液体是一种高浓度的缓冲液，广泛应用于核酸电泳实验中，特别是在琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中。TAE是Tris-Acetate-EDTA缓冲液的缩写，其主要成分包括三羟甲基氨基甲烷（Tris base）、乙酸（acetic acid）和乙二胺四乙酸（EDTA）。产品特性高效分离：TAE缓冲液在电泳大于13 kb的DNA片段时，能够取得更好的分离效果。迁移率快：双链线状DNA在TAE缓冲液中的迁移率较其他缓冲液快约10%。适用范围广：适用于基因组DNA、大分子超螺旋DNA、大于1500 bp的RNA和DNA的电泳分离。即用型设计：50×TAE液体为浓缩液，使用时只需用去离子水稀释50倍即可。使用方法配制1×TAE工作液：取20 mL的50×TAE液体，加入980 mL去离子水，充分混匀。电泳条件：凝胶浓度：通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。 电泳电压：建议4-10 V/cm，电泳时间根据片段大小调整。保存条件：室温保存，有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理：如果出现沉淀，可置于37℃水浴中使其溶解，不影响使用。

使用10×DNA Loading Buffer时，通常按照1:9（上样缓冲液：DNA样品）的比例混合

在分子生物学实验中，DNA合成是许多关键技术的核心，而dNTP Set Solution（脱氧核糖核苷三磷酸溶液套装）则是实现精准DNA合成的必备工具。dNTP Set Solution包含四种脱氧核苷三磷酸（dATP、dCTP、dTTP、dGTP），每种浓度均为100 mM，为各种需要DNA合成的实验提供了强大支持。 DNA合成是生命科学中最基本的生物化学过程之一，无论是PCR扩增、基因克隆还是DNA测序，都离不开dNTPs的参与。dNTP Set Solution中的四种脱氧核苷三磷酸是DNA合成的基本单元，它们在DNA聚合酶的作用下，按照碱基互补配对原则嵌入到新合成的DNA链中。每种dNTP的高浓度（100 mM）设计确保了在反应过程中有足够的原料供应，从而提高反应的效率和灵敏度。 dNTP Set Solution的高纯度和高浓度特性使其在多种实验中表现出色。例如，在PCR反应中，准确的dNTP浓度对于反应的特异性和准确性至关重要。dNTP Set Solution能够确保四种dNTP的比例一致，避免因某一种dNTP过量或不足而导致的扩增偏差。

其中，750 bp条带的浓度最高，约为20 ng/μL，其余条带浓度约为10 ng/μL。

在分子生物学实验中，DNA聚合酶的选择对于PCR反应的准确性和效率至关重要。Phusion DNA Polymerase以其卓越的高保真性和强大的扩增能力，成为了许多科研人员在高精度基因扩增实验中的首选酶。 Phusion DNA Polymerase是一种融合了多种酶活性的新型聚合酶，它结合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力。这种独特的酶组合使得Phusion酶在DNA合成过程中能够同时保证高准确性和快速扩增。其保真度比普通Taq酶高出约50倍，甚至比Pfu酶更高，这使得它在长片段DNA扩增和需要高准确性的基因克隆实验中表现出色。 Phusion DNA Polymerase的另一个显著特点是其强大的扩增能力。它能够高效扩增长达10 kb的DNA片段，这对于许多需要扩增长片段的研究项目来说是一个巨大的优势。例如，在基因组学研究中，Phusion酶能够准确地扩增复杂的基因组区域，为后续的测序和功能分析提供高质量的模板。

聚蔗糖（Ficoll）：增加样品密度，使样品能够沉入凝胶加样孔中。

在现代分子生物学实验室中，Taq PCR Master Mix（2×）是一种极为重要的实验试剂，它为聚合酶链式反应（PCR）的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性，成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix（2×）是一种预先配制好的PCR反应体系，其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs（脱氧核苷三磷酸）、反应缓冲液以及其他必要的成分，但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时，只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中，即可快速配制好反应体系，大大简化了实验操作步骤，节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix（2×）的高效性主要体现在以下几个方面。首先，它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力，能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次，预混液中的反应缓冲液经过优化，能够为Taq酶提供最佳的反应环境，确保反应的高效进行。此外，dNTPs的浓度也经过精确调整，能够满足PCR反应的需求，同时避免因过量而导致的副反应。

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